La serie A1 2009-10 fu il 76º campionato di seconda divisione di rugby a 15 in Italia.
Si tenne dal 27 settembre 2009 al 22 maggio 2010 tra 12 squadre a girone unico con una coda di play-off tra le prime tre classificate e la prima della serie A2.
La sua composizione fu influenzata da alcune defezioni: avendo infatti Calvisano e Capitolina rinunciato alla disputa del Super 10 2009-10, il campionato di prima divisione[1], i due posti lasciati liberi nella categoria superiore furono rimpiazzati dalla mancata retrocessione del GRAN Parma, ultimo la stagione precedente[1], e dalla promozione per ripescaggio della finalista di serie A sconfitta, L’Aquila[1]. Per effetto di ciò rimasero due posti liberi in serie A, riempiti da Firenze 1931, retrocesso ma ripescato[1], e da Badia (quarto in A2 2008-09)[1].
La stagione regolare fu vinta da Noceto di strettissimo margine su Mogliano e S.S. Lazio: le tre squadre giunsero, infatti, a un punto l'una dall'altra. La serie A2 fu altresì vinta dai siciliani del San Gregorio che spareggiarono nei play-off contro Noceto, che nel doppio confronto ebbe la meglio. La Lazio ebbe, invece, ragione di Mogliano e, nella finale tenutasi al Chersoni di Prato, i biancocelesti romani batterono Noceto e conquistarono promozione in Eccellenza e titolo di campione di serie A[2]. A retrocedere furono altresì Badia e Piacenza.
Il campionato, come nelle edizioni precedenti, si tenne a girone unico; a essere interessati ai play-off e ai play-out furono le prime tre classificate e le ultime due. Per quanto riguarda i play-off la loro composizione fu la seguente: