La Poule d'Essai des Poulains est une course hippique de plat se déroulant au mois de mai sur l'hippodrome de Longchamp.
C'est une course de Groupe I réservée aux poulains de 3 ans, disputée sur les 1 600 mètres de la grande piste et dotée d'une allocation de 600 000 €. C'est l'équivalent français des 2000 Guinées anglaises et irlandaises.
La Poule d'Essai des Poulains constitue le premier volet du triptyque classique pour les mâles, avec le Prix du Jockey-Club et le Grand Prix de Paris. Un seul cheval dans l'histoire est parvenu à remporter ces trois courses sur une distance croissante (1 600 m, 2 400 m, 3 000 m) : Perth, en 1899. Seuls cinq poulains ont réussi le doublé Poule d'Essai / Jockey-Club, quand celui-ci se courait sur 2 400 m : Heaume (1890), Perth (1899), Retz (1902), Dagor (1913), Right Royal (1961). Depuis que la distance du Jockey-Club a été réduite à 2 100 mètres en 2005, faire le doublé avec la Poule d'Essai est devenu plus aisé, et quatre chevaux y sont parvenus : Shamardal (2005), Lope de Vega (2010), Brametot (2017) et St Mark's Basilica (2021)
Edmond Blanc et le Prince Karim Aga Khan sont les propriétaires les plus titrés dans la course, avec huit victoires chacun. Le premier a vu ses couleurs l'emporter avec Arreau (1896), Governor (1900), Vinicius (1903), Gouvernant (1904), Val d’Or (1905), Ouadi Halfa (1907), Lord Burgoyne (1911) et Dagor (1913). Le second avec Buisson Ardent (1956), Zeddaan (1968), Kalamoun (1973), Blushing Groom (1977), Nishapour (1978), Ashkalani (1996), Daylami (1997) et Sendawar (1999).
Robert Denman est l'entraîneur qui a remporté le plus de Poule d'Essai, comptant onze succès avec Regain (1883), Archiduc (1884), Vinicius (1903), Gouvernant (1904), Val d’Or (1905), Ouadi Halfa (1907), Lord Burgoyne (1911), Dagor (1913), Le Traquet (1921), Sir Gallahad (1923) et Astérus (1926). À l'ère moderne, c'est François Mathet qui s'est imposé le plus souvent avec Tantième (1950), Relko (1963), Zeddaan (1968), Kalamoun (1973), Blushing Groom (1977), Nishapour (1978), et Melyno (1982).
Freddy Head est quant à lui le jockey le plus titré, avec six victoires : Green Dancer (1975), Red Lord (1976), Blushing John (1988), Linamix (1990), Hector Protector (1991) et Shanghai (1992).
En 2013, l'augmentation de l'allocation à 550 000 € permet à cette épreuve d'être la troisième course la plus richement dotée sur le mile après les Queen Elizabeth II Stakes (£ 1 100 000), à Ascot et le Prix Jacques Le Marois (600 000 €), à Deauville. La dotation est encore augmentée en 2017, à 600 000 €.
En 2016, l'épreuve est disputée exceptionnellement à Deauville sur un parcours en ligne droite, à cause des travaux de l'hippodrome de Longchamp. En , l'épreuve a également lieu sur l'hippodrome deauvillais.
Le record de l'épreuve appartient au Britannique Victory Note avec un temps de 1'34"50 en 1998.
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