Il Gran Premio Industria e Artigianato 2000, trentaquattresima edizione della corsa e ventiquattresima con questa denominazione, si svolse il 29 aprile su un percorso di 200 km, con partenza e arrivo a Larciano. Fu vinto dall'italiano Danilo Di Luca della Cantina Tollo davanti ai suoi connazionali Sergio Barbero e Nicola Miceli.