XbaI относится к эндонуклеазам рестрикции (Тип II, подтип P). То есть XbaI распознает палиндромную последовательность ДНК и осуществляет рестрикцию внутри палиндрома в фиксированной точке. В присутствии диметилсульфоксида (ДМСО) и при высоких концентрациях глицерина в среде XbaI теряет способность распознавать палиндром и осуществляет неспецифическую рестрикцию (звёздная активность) [источник не указан 2541 день]. После рестрикции образуются липкие концы с выступами из четырёх оснований.
Пример палиндромной последовательности, распознаваемой XbaI и образующиеся после рестрикции продукты
Палиндромный участок
Продукты рестрикции
5'-TCTAGA-3'
3'-AGATCT-5'
5'-T CTAGA-3'
3'-AGATC T-5'
XbaI рестриктазная активность ингибируется при метилировании аденина (DAM метилаза). Однако, рестриктазная активность сохраняется при метилировании цитозина (DCM- или CpG-метилазы) [источник не указан 2541 день].
XbaI широко используется в молекулярно-биологических исследованиях. В частность XbaI применяется при клонировании специфических нуклеотидных последовательностей [2], при рестрикционном анализе.