Инвентарь для проведения реакции Вассермана ныне музейный экспонатРеакция «четырёх крестов»: 1. «++++» — резко положительная реакция — полная задержка гемолиза; 2. «+++» — положительная реакция — значительная задержка гемолиза; 3. «++» — слабоположительная реакция — частичная задержка гемолиза; 4. «+» — сомнительная реакция - незначительная задержка гемолиза; 5. «-» — отрицательная реакция — полный гемолиз («лаковая кровь»).
Реакция Вассермана (RW), или ЭДС (экспресс-диагностика сифилиса) — метод диагностики сифилиса.
Названа по имени немецкого иммунолога Августа Вассермана, предложившего методику проведения этой реакции. В клинической практике зачастую все методы диагностики сифилиса называют реакцией Вассермана, хотя в лабораторной диагностике данная методика не используется в России с 1980-х годов[1][2]. Преимуществом реакции является простота её выполнения, недостатком — низкая специфичность, приводящая к ложноположительным результатам.
В настоящее время метод устарел и заменён реакцией микропреципитации (МР, или РМП (микрореакция с плазмой и инактивированной сывороткой (или реакция микропреципитации); RPR (тест быстрых плазменных реагинов (Rapid Plasma Reagins))[3] и др.).
Первый нетрепонемный тест, опубликован в 1906 г., назван реакцией Вассермана, основан на реакции связывания комплемента Борде-Жангу[3]. История открытия реакции Вассермана подробно описана в книге Л.Флека (1896—1961) «Возникновение и развитие научного факта»[4] (первое оригинальное издание вышло в 1935 г.[5]).
Техника
В образец крови или ликвора вводится антиген — кардиолипин из бычьегосердца. Сифилис-неспецифические антитела образуют реакцию с липидом — реакцию Вассермана антител антифосфолипида. Интенсивность реакции (1, 2, 3, или 4) указывает на серьёзность поражения.
Принцип: Образовавшийся в крови больного комплекс АГ-АТ сорбирует введенный в реакцию экзогенный комплемент. Гемолиз эритроцитов индикаторной системы (эритроциты барана-гемолитическая сыворотка) при этом отсутствует. Если же в крови больного нет АТ к возбудителю, происходит гемолиз эритроцитов барана в результате их взаимодействия с гемолитической сывороткой в присутствии свободного комплемента[3].
Диагностическая ценность
При первичном сифилисе реакция Вассермана становится положительной на 6—8 неделе течения заболевания (в 90 % случаев), при вторичном сифилисе она положительна в 98—100 % случаев. Вместе с другими серологическими реакциями (РПГА, ИФА, РИФ) позволяет не только выявить наличие возбудителя, но и выяснить приблизительный срок заражения.
По этой реакции (помимо осмотра пациента и других лабораторных исследований) оценивается эффективность проводимого лечения. Материалом для анализа является кровь пациента, которая берётся из вены. В процессе исследования крови происходит реакция связывания комплемента (РСК), позволяющая выявить наличие в крови антител к Treponema pallidum.
Реакция Вассермана также применяется в психиатрии для диагностирования прогрессивного паралича.
Специфичность
Реакция не специфична для сифилиса. Возможны положительное проявление реакции Вассермана и у здоровых людей при некоторых других, отличных от сифилиса заболеваниях (туберкулёз, системная красная волчанка, заболевания крови) и физиологических состояниях (беременность) и после родов. При малярии, туберкулёзе, некоторых вирусных и протозойных заболеваниях, проказе, пемфигусе, лептоспирозе, новообразованиях, во время менструации, после наркоза, после употребления накануне взятия крови спиртных напитков, жирной пищи, лекарств, введения чужеродных сывороток тоже может быть получен положительный ответ. В таких случаях для уточнения диагноза используются другие методы (РПГА, ИФА, РИФ).
Также инфицированный человек может не давать положительной реакции, а успешно вылеченный человек может продолжать давать положительный ответ (известный как «быстрый Вассерман» или «фиксированный»).
Современные методы диагностики сифилиса
Современные серологические тесты, применяемые для диагностики сифилиса, подразделяются на две большие группы: нетрепонемные и трепонемные[6].
Нетрепонемные тесты
(В тестах используется антиген нетрепонемного происхождения — кардиолипин-холестерол-лецитиновый комплекс)[7]
Тесты, рекомендованные к применению на территории Российской Федерации:
РМП — реакция микропреципитации с плазмой и инактивированной сывороткой (чувствительность: от 81 % при первичном сифилисе до 94—99 % при вторичном и скрытых формах сифилиса)[6];
RPR — тест быстрых плазменных реагинов (Rapid Plasma Reagins), или быстрый, или ускоренный плазмареагиновый тест;
Могут быть также использованы следующие их аналоги на территории Российской Федерации:
TRUST — тест с толуидиновым красным и непрогретой сывороткой (Toluidin Red Unheated Serum Test);
RST — тест на скрининг реагинов (Reagin Screen Test);
USR — тест на реагины с непрогретой сывороткой (Unheated Serum Reagins) .
РИФ бледной трепонемы: Бледная трепонема имеет 8—12 завитков и светится зеленым
Трепонемные тесты
(В тестах применяется антиген трепонемного происхождения — патогенная бледная трепонема, рекомбинантные белки, полученные генно-инженерным способом или пептиды, полученные путем искусственного химического синтеза.)[6]
Основные трепонемные тесты, рекомендуемые к применению на территории России:
↑Флек, Людвик. Возникновение и развитие научного факта: введение в теорию стиля мышления и мыслительного коллектива. — Москва: Идея-Пресс, Дом интеллектуальной книги., 1999. — С. 220. с. — ISBN 5-7333-0018-3.
↑Ludwik Fleck. Entstehung und Entwicklung einer wissenschaftlichen Tatsache. Einführung in die Lehre vom Denkstil und Denkkollektiv. — Basel: Schwabe und Co., Verlagsbuchhandlung, 1935.
↑Pangborn MC. Cardiolipin and its application in a chemically purified antigen for the serodiagnosis of syphilis.. — N Y State Assoc Public Health Lab., 1946.