Principessa Unikitty (doppiato da Tara Strong, Claudia Scarpa in Italiano)[3] - La ex principessa del Paese del Cucù e ora sovrana del Unikingdom è un ibrido gatto / unicorno rosa. È molto felice, giocosa, carina e ottimista, ma ha un lato rabbioso che a volte lotta per controllare. Nei film è doppiata dall'attrice Alison Brie.
Principe Cucciolino (doppiato da Grey Griffin, Emanuela Ionica in Italiano) - Il fratello minore di Unikitty (fratello maggiore nello spin-off), un ibrido cane carlino/ unicorno blu. A volte è confuso e ingannato, ma è anche leale e di buon cuore. Nello spin-off è doppiato da Josh Pais in originale e da Alessio De Filippis in italiano.
Dr. Volpe (doppiato da Kate Micucci, Claudia Scarpa in Italiano)[3] - Una volpe rossa che è lo scienziato residente del castello i cui esperimenti e invenzioni possono sia creare e risolvere problemi.
I robot della Dr. Volpe: piccoli robot che funzionano per il Dr. Volpe.
Falcondrillo (doppiato da Roger Craig Smith, Francesco De Francesco in Italiano) - La fedele guardia del corpo di Unikitty con falco / coccodrillo ibrido che ha una personalità "macho" e sembra avere una cotta per il Dr. Volpe. Si è allenato per diventare un combattente nella Action Forest.
Richard (doppiato da Roger Craig Smith, Massimo Bitossi in Italiano)[3] - Un mattoncino grigio Lego 1x3 che è il consigliere reale di Unikitty e il custode della proprietà del castello. Parla con una voce monotona sordo ed è spesso la voce della ragione, anche se gli altri lo trovano noioso da ascoltare.
Antagonisti
Signor Frown (doppiato da Eric Bauza, Daniele Raffaeli in Italiano)[4] - L'arcinemico di Unikitty che viene da Frown Town dall'altra parte del regno di Unikitty. È uno dei Signori del Destino che diffonde il dolore e la miseria in tutto il mondo mentre vuole impressionare gli altri Signori del destino. Questo spesso gli fa soffrire l'ira di Unikitty, che vuole diffondere divertimento e gioia.
Brock (doppiato da H. Michael Croner, Luigi Ferraro in Italiano) - Una lapide antropomorfa con una personalità neutrale che è l'amico intimo e il compagno di stanza di Signor Frown. Brock si aggirava spesso nel suo appartamento giocando ai videogiochi che aiutare il Signor Frown con le sue trame. L'unica volta che si arrabbia è quando Signor Frown trascura la sua parte delle faccende.