Bartolomé de la Cueva y Toledo a un fils illégitime. Il est clerc au diocèse de Segovia. Avec son frère Luis, il accompagne Charles Quint sur son voyage à Italie en 1529.
Il participe au conclave de 1549-1550 lors duquel Jules III est élu, aux deux conclaves de 1550 (élection de Marcel II et élection de Paul IV) et au conclave de 1559 (élection de Pie IV).