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2A肽（英語：2A self-cleaving peptides）是一類长18-22个氨基酸殘基的肽片段，能誘導細胞內含有2A肽的重組蛋白自我剪切。^[1]^[2]这种肽都有一段的序列模体（英语：sequence motif），经常会在最后甘氨酸（G）和脯氨酸（P）连接处导致核糖体无法连接，从而造成“剪切”的效果。这种肽在很多科病毒中都有分布。^[3]^[4]

目前一共有4種常用的2A肽：T2A、P2A、E2A、F2A。它們都是以來源的病毒命名的。例如第一種發現的2A肽F2A源於手足口病毒（英语：foot-and-mouth disease virus），而手足口病毒的英文名稱「foot-and-mouth disease virus」首字母是「F」，因此這種2A肽得名F2A。2A本身源自微小核糖核酸病毒科的基因命名方式。^[1]

類型

生物研究用到的2A肽目前一共有4種： P2A、E2A、F2A、T2A。其中F2A源於手足口病毒（英语：foot-and-mouth disease virus）（Foot-and-mouth disease virus）、E2A源於馬甲型鼻炎病毒（Equine rhinitis A virus）、P2A源於豬捷申病毒（英语：Porcine teschovirus）（Porcine teschovirus）、T2A源於明脉扁刺蛾病毒（Thosea asigna virus）^[1]。

下表羅列了四種2A肽的序列。雖然對2A肽的功能而言不是必要條件，在2A肽序列的N端加上一個GSG（Gly-Ser-Gly，甘氨酸、絲氨酸、甘氨酸）序列能提高2A肽誘導剪切的效率^[5]。

種類	序列
T2A	(GSG) EGRGSLL TCGDVEENPGP
P2A	(GSG) ATNFSLLKQAGDVEENPGP
E2A	(GSG) QCTNYALLKLAGDVESNPGP
F2A	(GSG) VKQTLNFDLLKLAGDVESNPGP

描述

2A肽誘導的剪切效率較高，部分情況下，剪切效率可以達到接近100%。現有證據支持轉譯時2A肽會誘使核糖體在合成至2A肽中斷裂處的穀氨酸時，提早將前半段已合成的肽鏈放出，從而以2A肽為界形成二段多肽^[6]^[7]，但目前尚不完全清楚這一過程具體的分子機制^[8]^[9]。

應用

在基因工程中，2A肽可令一個開放讀框（ORF）轉譯出的肽鏈分爲數個獨立的肽鏈。如果需要令兩個蛋白分開表達（例如需要一個蛋白進入細胞核、另一個蛋白在細胞質中表達），又希望只在載體上構建一個開放讀框，可在它們的編碼區中插入一段2A肽序列。除此之外，如果兩個蛋白融合後，融合蛋白沒有功能，可以在兩個蛋白的編碼區中間插入一段編碼2A肽的序列，或將連結肽更換爲2A肽，使轉譯完成後兩個蛋白分開，獨立進行摺疊。這樣做有很大機會使兩個蛋白恢復功能^[10]。

IRES同樣可以從一個開放讀框翻譯出兩個肽鏈^[11]，但其特性略有不同：由IRES分隔的兩段肽鏈雖在同一個轉錄本上，但因它們各自獨立轉譯，合成的肽鏈不會包含IRES序列；另外在IRES上游的肽鏈表現效率高於位在下游的肽鏈^[12]。相對而言，2A肽本身的序列在剪切後仍然分別存在於上下游的二個產物肽鏈，在表現效率上，2A肽鏈上下游的肽鏈表現量相近^[12]。搭配使用2A肽與IRES或是使用多個2A肽均可以在一個開放讀框中表達多個重組蛋白^[13]。

不完全剪切

不同2A肽序列造成的“剪切”效率各有不同，其中P2A最高，F2A最低。^[14]以F2A连接的蛋白质有高达50%会形成融合蛋白，造成获得新功能等意想不到的结果。^[15]

參見

參考

^ ^1.0 ^1.1 ^1.2 Liu, Ziqing; Chen, Olivia; Wall, J. Blake Joseph; Zheng, Michael; Zhou, Yang; Wang, Li; Ruth Vaseghi, Haley; Qian, Li; Liu, Jiandong. Systematic comparison of 2A peptides for cloning multi-genes in a polycistronic vector. Scientific Reports. 2017, 7 (1). ISSN 2045-2322. doi:10.1038/s41598-017-02460-2.
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