Леся Никитюк родилась в городе Хмельницком 19 октября1987 года. Мама — Никитюк Екатерина Петровна, отец — Никитюк Иван Иванович, рабочие ОАО «Укрэлектроаппарат». После окончания школы Леся получила высшее образование в Хмельницкой гуманитарно-педагогической академии. Во время учёбы девушка была участницей команды КВН «Торнадо Люкс»[1]. Постановка «Галя, я в маршрутке» собрала более 6 000 000 просмотров на YouTube[2].
В 2009 году Леся в компании со своей близкой подругой Ольгой Панасенко начала выступать в «Бигуди шоу»[3]. В 2011 году Леся и Ольга приняли участие в шоу «Рассмеши комика», где им удалось заработать 10 000 гривен, но рубеж в 20 000 гривен им не покорился. В 2012 году они снова выступили на этом шоу, и на этот раз им удалось рассмешить юмористов на 50 000, а затем ещё на 20 000 гривен[1].
В 2012 году Леся стала ведущей познавательной телепередачи о путешествиях «Орёл и решка», заменив Жанну Бадоеву. Её соведущим был Андрей Бедняков. В 2013 году на канале К1 стартовала авторская передача Леси о шоу-бизнесе — «Леся-ЗдЄся»[4].
8 февраля 2015 года начался показ юбилейного, 10-го сезона передачи «Орёл и решка», в котором Леся Никитюк приняла участие вместе с другими «коллегами» по шоу. В том же году Леся Никитюк вместе с Андреем Бедняковым, Региной Тодоренко и Жанной Бадоевой снялась в клипе Светланы Лободы «Пора домой». Также Никитюк была номинирована на национальную телевизионную премию «Телетриумф» как ведущая развлекательной программы[5]. 10 декабря 2015 года Леся Никитюк отправилась в кругосветное путешествие вместе с телепередачей «Орёл и Решка», но после 24-го выпуска покинула «Кругосветку» в пользу своего нового шоу[6][7]. Её заменил Петр Романов. На украинском телеканале «Интер» шоу получило название «Вокруг М»[8], на российском телеканале «Пятница» оно же получило название «Леся здеся»[9]. На этот раз оно посвящено не шоу-бизнесу, а мужчинам со всего мира. Премьера шоу состоялась 10 сентября 2016 года на телеканале «Интер» и «Пятница».
В декабре 2016 года приняла участие в откровенной фотосессии для мужского журнала «XXL»[1][10]. В конце 2016 года Леся отправилась вместе с Региной Тодоренко на съёмки 13-го сезона «Орёл и решка» в «самые райские и адские места мира»[11]. Премьера сезона состоялась 13 февраля 2017 года.
Летом 2017 года стало известно, что Леся появится в качестве ведущей и капитана женской команды в 7 сезоне развлекательного шоу «Хто зверху?» на Новом канале и составит компанию Сергею Притуле. Это подтвердили в пресс-службе телеканала. Сезон шоу с участием Леси зрители увидели весной 2018 года.
В 9 выпуске шоу Оли Поляковой «Зоряні яйця» Леся участвовала в команде ведущих «Хто зверху?» вместе с Притулой и Педаном, их соперниками была команда «Лига смеха».
В ноябре 2017 года Леся Никитюк приняла участие во втором полуфинале третьего сезона шоу «Лига смеха» на 1+1, где сыграла за команду «Стояновка» из Молдовы, в качестве звёздного игрока[12][13].
В конце августа 2018 стала ведущей развлекательного шоу «Хто проти блондинок?»[14]. В том же году заняла 2 место в телешоу «Танцы со звездами» на телеканале СТБ в паре с Максимом Ежом.
В ноябре 2019 года стала ведущей телевизионного проекта «Le Маршрутка»[15].
Телеведущая не замужем. В 2017 году Леся сообщила публике, что выходит замуж за своего соседа. Однако через два года стало известно, что свадьбы не будет.