Het seizoen 1964/1965 was het 10e en laatste jaar in het bestaan van de Enschedese betaaldvoetbalclub Enschedese Boys. De club kwam uit in de Eerste divisie en eindigde daarin op de zevende plaats. Tevens deed de club mee aan het toernooi om de KNVB beker, hierin werd in de kwartfinale verloren van NAC (1–2). Aan het eind het seizoen fuseerde de club met Sportclub Enschede en ging verder onder de naam FC Twente.