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De nombreux inhibiteurs éliminent la flore associée :
ions Lithium à haute concentration
cycloheximide antifungique
Colistine, Céfotetan et Fosfomycine antibiotiques antibactériens
Acroflavine
La mise en évidence de l'hydrolyse de l'esculine par une β-glucosidase est réalisée par une précipitation du produit d'hydrolyse (coumarine) avec le fer III donnant un halo noirâtre autour des colonies. Le milieu est utilisé pour l'isolement sélectif de Listeria monocytogenes qui hydrolyse l'esculine : les colonies caractéristiques sont donc noires ou grises de 1 mm de diamètre en 24 h , s'incrustent dans la gélose après 48 h d'incubation en augmentant de taille à 2 mm environ.[réf. nécessaire]
Dans le cas du dénombrement, les colonies suspectes sont identifées par leurs caractères phénotypiques (5 colonies par boite)
