Die 1. fotbalová liga 1965/66 war die 35. Spielzeit der höchsten tschechoslowakischen Spielklasse im Fußball der Männer. Die Saison begann am 13. August 1965 und endete am 5. Juni 1966.
Meister wurde der FK Dukla Prag. Das Team sicherte sich den achten Meistertitel am letzten Spieltag mit einem 5:1 gegen TJ VSS Košice. Gleichzeitig profitierte Dukla von den Niederlagen der Prager Mannschaften Sparta und Slavia, die vor dem letzten Spieltag auf den Plätzen 1 und 2 lagen.
Die 14 Mannschaften spielten im Verlauf der Saison zweimal gegeneinander; einmal zu Hause und einmal auswärts. Somit bestritt jede Mannschaft 26 Spiele. Die zwei letzten Teams stiegen ab.
Vereine
TJ Slovnaft Bratislava wurde umbenannt in Inter Slovnaft Bratislava
Slovan Teplice wurde umbenannt in Sklo Union Teplice